中文名稱:4-羥乙基哌嗪乙磺酸
英文簡稱:HEPES
概述:HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。高度極性,對多種化學(xué)試劑和酶是惰性,不參加和不干擾生物化學(xué)反應(yīng)過程,對酶化學(xué)反應(yīng)等無抑制作用,所以可專門用于細(xì)胞器和極易變性的、對pH敏感的蛋白質(zhì)和酶的研究工作。其最大優(yōu)點(diǎn)是在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時能維持較恒定的PH值,對細(xì)胞基本無損害.在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。使用終濃度為10-50mmol/L,一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。
參數(shù):
外觀性狀 | 白色結(jié)晶粉末 | 熔點(diǎn) | 234-238 °C |
CAS號 | 7365-45-9 | 閃點(diǎn) | N/A |
分子式 | C8H18N2O4S | 純度 | ≥99% |
分子量 | 238.305 | 儲存條件 | 2-8°C |
密度 | 1.3±0.1 g/cm3 | 重金屬 | ≤0.05% |
沸點(diǎn) | N/A | pKa | 4.5-7.65 |
規(guī)格 | 10g/瓶 |
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用途:用作生化試劑。生物緩沖劑;分離與分析RNA核組分的反應(yīng)緩沖液、預(yù)雜交緩沖液、雜交緩沖液;用于RNA與T4RNA。分子生物學(xué)級用于用T4RNA連接酶進(jìn)行RNA3'-末端標(biāo)記,分離與分析核RNA之反應(yīng)緩沖液組分、預(yù)雜交緩沖液緩和雜交緩沖液成分。細(xì)胞-細(xì)胞黏附,細(xì)胞短期聚集培養(yǎng),清洗組織、細(xì)胞所用緩沖液。
配制:細(xì)胞培養(yǎng)常用10mmol/L,10mmol/L HEPES緩沖液配制方法如下:準(zhǔn)確稱取HEPES 2.383g,加入新鮮三蒸水定容至1L。過濾除菌,分裝后4℃保存,根據(jù)具體實驗要求操作。如果用于加入細(xì)胞培養(yǎng)液中作緩沖劑,建議培養(yǎng)液避光保存,因為有研究報道培養(yǎng)液中的HEPES在可見光下暴露3h以上將產(chǎn)生對細(xì)胞有毒性的過氧化氫。
注意事項:
1、注意無菌操作,盡量避免污染
2、高濃度HEPES緩沖液對某些細(xì)胞可能有一定的毒性作用
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。